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Sanger Sequenzierung

26.2.2021

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Biologie Präsentationsleistung: Dokumentation SANGER- SEQUENZIERUNG Kaspar Fleckenstein Gymnasium Blankenese, S2 DNA-SEQUENZIERUNG NACH SANGER Präsentationsleistung am 23.02.2021 von Kaspar Fleckenstein, Biologie S2, Frau Lautenschlager 1 Gymnasium Blankenese Biologie S2, Frau Lautenschlager Kaspar Fleckenstein Dokumentation der Präsentationsleistung Aufbau DNA DNA Sequenzierung nach Sanger Thema: Aufbau der DNA Um die Basensequenz eines DNA-Stranges genau zu bestimmen, wurden mehrere Verfahren entwickelt, die sich automatisiert durchführen lassen. Dabei werden die Methoden immer weiterentwickelt und modifiziert. Aufgabe: Erläutern Sie das Verfahren der DNA-Sequenzierung nach Sanger und ihre Bedeutung in der molekularbiologischen Forschung. Datum der PL: 23.02.2021 In der gesamten Dokumentation ist mit DNA-Sequenzierung immer die DNA-Sequenzierung nach Sanger gemeint! Gliederung: 1. Thematik 2. Leitfrage 3. Genaue Definition 4. Geschichtliche Entdeckung und Entwicklung der DNA-Sequenzierung 5. Bestandteile der DNA-Sequenzierung 6. Ablauf der DNA-Sequenzierung 6.1.1.Denaturierung 1 6.1.2.Hybridisierung 6.1.3. Vorbereitung fürs weitere Verfahren 6.1.4.Polymerisierung 6.1.5.Denaturierung 2 6.1.6. Auswertung 7. Unterschiede zwischen der DNA-Sequenzierung, der Polymerasekettenreaktion (PCR) und der Replikation 8. Bedeutung der DNA-Sequenzierung in der molekularbiologischen Forschung und Anwendung 9. Aktuelle Relevanz in der Corona-Pandemie 10. Eidesstattliche Erklärung 11. Quellen 1. Thematik: Ohne die DNA würde kein Leben existieren. Sie steckt in jedem Organismus und bildet die Grundlage allen Lebens. Sie speichert alle Informationen, die ein Lebewesen ausmachen. Sie dient der Entwicklung und durch sie können die Erbinformationen an Nachfahren weitergegeben werden. Außerdem ist die DNA ein Bauplan für Proteine. Ein einzelner DNA-Strang besteht aus mehreren aneinandergereihten Nukleotiden. Diese bestehen von innen nach außen aus einer der vier Nukleinbasen, Desoxyribose und einer Phosphatgruppe. Die Einzelstränge...

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sind zwischen den Basen durch Wasserstoffbrückenbindungen miteinander verbunden. Dabei stehen sich die Base Guanin nur Cytosin und die Base Adenin nur Thymin gegenüber. 2. Leitfrage: ,,Wie funktioniert die Kettenabbruchmethode und wieso erhielt Frederick Sanger einen Nobelpreis für seine Arbeit?" 3. Definition: ,,DNA Sequenzierung (engl. dna sequencing) ist die Ermittlung der genauen Abfolge der Nukleotide (DNA- Bausteine) in der DNA und verhilft dadurch zur Entschlüsselung der Erbinformationen." studyfix: Sanger Sequenzierung. https://studyflix.de/biologie/sanger-sequenzierung-2486 4. Geschichtliche Entdeckung und Entwicklung der DNA-Sequenzierung: Die DNA-Sequenzierung nach Sanger wird auch Kettenabruchmethode genannt. Sie wurde ungefähr 1975 1 Thema: THEMA UND AUFGABE Um die Basensequenz eines DNA-Stranges genau zu bestimmen, wurden mehrere Verfahren entwickelt, die sich automatisiert durchführen lassen. Dabei werden die Methoden immer weiterentwickelt und modifiziert. Kaspar Fleckenstein, Biologie S2, Frau Lautenschlager Aufgabe: Erläutern Sie das Verfahren der DNA- Sequenzierung nach Sanger und ihre Bedeutung in der molekularbiologischen Forschung. 2 Gymnasium Blankenese Biologie S2, Frau Lautenschlager Kaspar Fleckenstein Dokumentation der Präsentationsleistung Aufbau DNA DNA Sequenzierung nach Sanger Datum der PL: 23.02.2021 von Sanger und Coulsen entwickelt. Damals konnte Sanger gerade mal die Reihenfolge von ca. 5 Basen in der Woche bestimmen. 1977 wurde die Methode erstmals mit einer vollständigen Sequenz eines Genoms vorgestellt. Sanger wurde 1980 für die Entdeckung der Kettenabbruchmethode mit dem Nobelpreis für Chemie ausgezeichnet. Seit ihrer Entwicklung war die Sanger-Sequenzierung in den letzten 40 Jahren die am weitesten verbreitete DNA-Sequenzierungsmethode und wird nach wie vor weltweit eingesetzt 5. Bestandteile der DNA-Sequenzierung: Zur DNA-Sequenzierung nach Sanger benötigt man die zu sequenzierende DNA-Einzelstrang Sequenz, eine ausreichende Menge von den vier Desoxynukleosidtriphosphate (dNTP), die Taq-Polymerase, welche Hitze besser überstehen kann, radioaktiv markierte Primer und die vier verschiedenen Abbruch- Nukleosidtriphosphate (ddNTP), welche keine 3' OH-Gruppe besitzen. Außerdem benötigt man später zur Auswertung die Gel-Elektrophorese. 6. Ablauf der DNA-Sequenzierung (erster Teil der Beantwortung der Leitfrage): 6.1. Denaturierung 1: Bei etwa 94°C werden durch die Hitze die Wasserstoffbrückenbindungen der DNA- Doppelstränge getrennt. Es entstehen zwei Einzelstränge (Matrizen). Einen davon benutzen wir als Vorlage. 6.2. Hybridisierung: Bei etwa 50°C setzt sich komplementär an eine der Matrizen der radioaktiv markierte Primer, welcher nur aus wenigen Nukleotiden besteht. 6.3. Vorbereitung fürs weitere Verfahren: Die mit radioaktiv markierten Primer versehenen Matrizen werden nun mit der Taq-Polymerase und den Desoxynukleosidtriphosohaten in vier verschiedene Reagenzgläser gebracht, welche jeweils Eines der Abbruch-Nukleosidtriphosphate beinhalten. Also sind in dem ersten Reagenzglas beispielsweise nur Adenin-Abbruchnukleotide, in dem zweiten nur Cytosin-Abbruchnukleotide und so weiter. Diese Abbruch-Nukleosidtriphosphate rufen den Abbruch der Synthese hervor, da sie so modifiziert wurden, dass sie keine 3' OH-Gruppe besitzen, welche zum Anbinden weiterer Nukleotide notwendig ist. 6.4. Polymerisierung: Bei etwa 60°C setzt sich die Taq-Polymerase an den radioaktiv markierten Primer an. Nun synthetisiert sie den komplementären Strang von 5' in 3' Richtung. Sie baut nun die Desoxynukleosidtriphosphate passend ein. Dabei kann es passieren, dass sie zufällig eines der Abbruch- Nukleosid-Triphosphate einbaut. Dann wird die Sequenzierung gestoppt, also die Kette abgebrochen. Wird dies immer wieder wiederholt, bilden sich unterschiedlich lange DNA-Fragmente, welche in den jeweiligen Gefäßen immer mit dem gleichen Basenpaar enden. Am Ende soll jedes mögliche DNA-Fragment vorhanden sein. 6.5. Denaturierung 2: Nun werden die DNA-Fragmente erneut denaturiert, um durch Gel-Elektrophorese ausgewertet zu werden 6.6. Auswertung: Die DNA-Fragmente werden jetzt parallel durch Gel-Elektrophorese der Größe nach sortiert. Durch eine elektrische Spannung wandern die negativ geladenen DNA-Fragmente zum Pluspol. Dabei gelangen die kleineren und leichteren Fragmenten schneller durch das Gel als die längeren und schwereren. Durch Autoradiographie werden die Fragmente sichtbar gemacht. Das gelingt, da die Primer radioaktiv markiert wurden. Jetzt kann man die Basenabfolge des neusynthetisierten DNA-Einzelstrangs in Richtung 5' nach 3' ablesen. Das DNA-Fragment, das den weitesten Weg zurückgelegt hat, ist beispielsweise aus dem Reagenzglas mit den Adenin-Stopp-Nukleotiden. Das bedeutet dann, dass dieses Fragment das kürzeste ist und direkt nach dem Primer das Adenin-Stopp-Nukleotid eingesetzt wurde. Die erste Base des komplementären Stranges ist in dem Fall also Adenin. Nachdem man die Basenabfolge des komplementären Stranges abgelesen hat, kann man sich die ursprüngliche Matrize mit Leichtigkeit ableiten. 7. Unterschiede der DNA-Sequenzierung mit der Polymerasekettenreaktion (PCR) und der Replikation: Der erste Unterschied liegt in der Denaturierung. Während bei der Replikation die DNA in zwei Einzelstränge durch das Enzym Helikase geteilt wird, wird dieser Vorgang bei der PCR-Methode und der DNA-Sequenzierung durch Hitze hervorgerufen. Ein zusätzlicher Unterschied lässt sich bei den Primern erkennen. Bei der PCR ist dieser ein DNA-Primer und bei der Kettenabbruchmethode ist dieser noch radioaktiv markiert. Bei der Replikation handelt es sich um ein RNA-Primer. Außerdem braucht man bei der Kettenabbruchmethode nur einen Primer. 2 1. Einleitung: 1. Aufbau der DNA 2. Definition 3. Leitfrage 2. Hauptteil: 1. Geschichtliche Entdeckung und Entwicklung der Sanger-Sequenzierung 2. Bestandteile der Sanger-Sequenzierung 3. 4. AGENDA Ablauf der Sanger-Sequenzierung Bedeutung und Anwendung in der molekularbiologischen Forschung und aktuelle Relevanz in der Corona- Pandemie Schluss: 3. 1. Beantwortung der Leitfrage 4. Quellen Kaspar Fleckenstein, Biologie S2, Frau Lautenschlager X 3 EINLEITUNG Kaspar Fleckenstein, Biologie S2, Frau Lautenschlager 4 Gymnasium Blankenese Biologie S2, Frau Lautenschlager Kaspar Fleckenstein Dokumentation der Präsentationsleistung Aufbau DNA DNA Sequenzierung nach Sanger Außerdem wird die Sequenzierung unterschiedlich beendet. Im Gegensatz zu den anderen Verfahren wird bei der Replikation die gesamte Matrize sequenziert. Bei der DNA-Sequenzierung endet sie, sobald zufällig ein Abbruch-Nukleosidtriphosphat eingebaut wird und bei der PCR-Methode verläuft die Sequenzierung im von den Primern eingerahmten Abschnitt. Auch wird am Ende für die anschließende Trennung in der Gel-Elektrophorese bei der Kettenabbruchmethode nochmals zu Einzelsträngen denaturiert. Dies ist bei den anderen Methoden nicht der Fall Datum der PL: 23.02.2021 8. Bedeutung der DNA-Sequenzierung in der molekularbiologischen Forschung und Anwendung (zweiter Teil der Beantwortung der Leitfrage): Sangers Kettenabbruchverfahren war zur damaligen Zeiten ein großer Durchbruch. Sie hat die molekularbiologische Forschung stark vorangetrieben. Durch sie konnte man erstmals viele verschiedene DNA-Sequenzen miteinander vergleichen. Zum einen lassen sich mit der Basenabfolge früh Erkrankungen feststellen. Anders wird das Verfahren auch benutzt, um Abstammungen und Verwandtschaftsbeziehungen von Lebewesen festzustellen. Außerdem können damit Resistenzen bekämpft werden. Jedoch wird die DNA-Sequenzierung nach Sanger heute wird nur noch teilweise angewendet, da sie eher als veraltet gilt. Durch die Einführung von Next Generation Sequenzing (NGS) - Technologien wurden verlässlichere Alternativen zu der klassischen DNA-Sequenzierung nach Sanger geschaffen. Diese weisen eine höhere Genauigkeit, eine höhere Kapazität und sind dazu noch leichter zu handhaben. 9. Aktuelle Relevanz in der Corona-Pandemie: Die DNA-Sequenzierung nach Sanger spielte bzw. spielt auch eine kleine Rolle bei der Bekämpfung der Pandemie. Zu Beginn der Pandemie wurde die Sanger Sequenzierung von mehreren Labors eingesetzt, um den Erreger als SARS-CoV-2 festzustellen, jedoch wurden und werden dafür nun eher die Next Generation Sequenzing (NGS) - Technologien genutzt. 10. Eidesstattliche Erklärung: Ich versichere, dass die Präsentation von mir selbstständig erarbeitet wurde und ich keine anderen als die gegebenen Hilfsmittel benutzt habe. Diejenigen Teile der Präsentation, die anderen Werken im Wortlaut oder dem Sinn nach entnommen wurden, sind als solche gekennzeichnet. Kaspar Fleckenstein Hamburg, den 16.02.2021 3 AUFBAU DER DNA Kaspar Fleckenstein, Biologie S2, Frau Lautenschlager DNA Doppelstrang mit Basenpaaren Adenin Thymin Guanin Cytosin Phosphat gruppe Nukleotid Desoxyribose 5 Gymnasium Blankenese Biologie S2, Frau Lautenschlager Kaspar Fleckenstein Dokumentation der Präsentationsleistung Aufbau DNA DNA Sequenzierung nach Sanger 11. Quellen: https://www.ancestry.de/lp/dna-function https://de.wikipedia.org/wiki/Desoxyribonukleinsäure https://www.simplyscience.ch/teens-liesnach-archiv/articles/was-ist-dna.html https://www.simplyscience.ch/teens-liesnach-archiv/articles/dna-kann-man-lesen.html https://viamedici.thieme.de/lernmodul/549699/subject/biochemie/molekularbiologie/nucleotide+und+nuclein säuren/nucleotide+aufbau+und+funktionen https://flexikon.doccheck.com/de/Sanger-Sequenzierung https://www.youtube.com/watch?v=JcfnrJDTPG0 https://studyflix.de/biologie/dna-sequenzierung-2485 https://nebula.org/blog/de/dna-sequenzierung/ https://www.bio-sell.de/molekularbiologie/dntps.html https://www.youtube.com/watch?v=FsrCOksFz34&t=195s https://www.youtube.com/watch?v=JcfnrJDTPG0&t=29s http://www.biologie-schule.de/gelelektrophorese.php https://www.studyhelp.de/online-lernen/biologie/dna-replikation/ Datum der PL: 23.02.2021 https://www.thermofisher.com/de/de/home/life-science/sequencing/sanger-sequencing/applications/sars-cov- https://www.googleadservices.com/pagead/aclk?sa=L&ai=DChcSEwjkj5ew6ezuAhVig4MHHTKRBBOYA BAAGgJIZg&ae=2&ohost=www.google.com&cid=CAESQOD2a10nUbzHtlyooUZT83btrZlgXNMhrOa9B 2-research.html UKPWyucc4KhgiLdyUnbruhHOX3eCbWH1F0_DkD8- D6DW9vkiuE&sig=AOD64_0ykjzOV2XXxuSFfipoVPofxze- 8A&q&adurl&ved=2ahUKEwjp3Y6w6ezuAhUHhlwKHVmgBNUQ0Qx6BAgXEAE&dct=1 https://www.studyhelp.de/online-lernen/biologie/dna-replikation/ https://de.wikipedia.org/wiki/Replikation Grüne Reihe Biologie Materialien S II Genetik, Schroedel, Druck A7/Jahr 2019 Seite 53 bis 55, 66 4 DEFINITION ,,DNA Sequenzierung (engl. dna sequencing) ist die Ermittlung der genauen Abfolge der Nukleotide (DNA-Bausteine) in der DNA und verhilft dadurch zur Entschlüsselung der Erbinformationen." studyfix: Sanger Sequenzierung. https://studyflix.de/biologie/sanger-sequenzierung-2486 Kaspar Fleckenstein, Biologie S2, Frau Lautenschlager LEITFRAGE ,,Wie funktioniert die Kettenabbruchmethode und welche Bedeutung hatte die Sanger-Sequenzierung für molekularbiologische Forschung und Medizin? Kaspar Fleckenstein, Biologie S2, Frau Lautenschlager 7 Kaspar Fleckenstein, Biologie S2, Frau Lautenschlager HAUPTTEIL 8 ● ● GESCHICHTLICHE ENTDECKUNG/ENTWICKLUNG ca.1975 von Alan Coulsen und Frederick Sanger entwickelt 1977 erstmals vollständige Sequenz eines Bakterien-Genoms vorgestellt 1980 Sanger mit Nobelpreis für Chemie ausgezeichnet Kaspar Fleckenstein, Biologie S2, Frau Lautenschlager 1. DNA-Einzelstrangabschnitt 2. Ausreichende Menge an den vier Desoxynucleosidtriphosphaten (dNTP) 3. Sowie an den vier verschiedenen Abbruch-Nukleosidtriphosphaten NTP 4. Radioaktiv markierte Primer 5. Taq-Polymerase 6. Gel-Elektrophorese BESTANDTEILE Kaspar Fleckenstein, Biologie S2, Frau Lautenschlager X OCH₂ H -OCH₂ H H Dideoxynucleotide (ddNTP) H H OH H O H H Deoxynucleotide (dNTP) Base H Base H O 10 ABLAUF erster Teil der Beantwortung der Leitfrage: Wie funktioniert die Kettenabbruchmethode? Kaspar Fleckenstein, Biologie S2, Frau Lautenschlager 1. DENATURIERUNG - Bei ca. 94°C - Durch Hitze WBB getrennt - Es entstehen zwei Einzelstränge, einer dient als Vorlage Kaspar Fleckenstein, Biologie S2, Frau Lautenschlager 5₁ 3' Schritt 1 Denaturierung 3' lio 5 5 3¹ UNU 12 3' 5 2. HYBRIDISIERUNG - Bei ca. 50°C - Primer setzt sich komplementär an Matrize - Denaturierung und Hybridisierung werden so oft durchgeführt, dass Millionen oder gar Milliarden Matrizen vorhanden sind Kaspar Fleckenstein, Biologie S2, Frau Lautenschlager Primerhybridisierung Schritt 2 Radioaktiv markierter Primer BTiTB 3' Matrize 5 13 VORBEREITUNG FÜRS WEITERE VERFAHREN - Matrizen mit Taq-Polymerase und dNTPs in vier verschiedene Reagenzgläser · In jedem Reagenzglas jeweils eine Art der ddNTPs Kaspar Fleckenstein, Biologie S2, Frau Lautenschlager Primer TTT 5' 3' 3' Enzym: Polymerase + Glas 1 DNA-Halbstrang Enzym: Polymerase + L Glas 2 Enzym: Polymerase T +L Glas 3 Enzym: Polymerase +L Glas 4 14 15' 3. POLYMERISIERUNG - Bei ca. 60°C - Taq-Polymerase setzt sich an Primer an und synthestisiert von 5* zu 3* - Sie baut dNTPs komplementär ein - manchmal wird zufällig ein ddNTP eingebaut und die Kette wird abgebrochen - wird sehr oft gemacht, das unterschiedlich lange Fragmente enstehen - Ziel: jedes mögliche Frgm. soll vorhan sein Kaspar Fleckenstein, Biologie S2, Frau Lautenschlager 11 Mily 15 4. DENATURIERUNG 2 - doppelsträngige DNA-Fragmente werden erneut denaturiert - nur der neu-synthetisierte Einzelstrang mit dem radioaktiv-markiertem Primer ist noch wichtig - alle einzelsträngige DNA-Fragmente aus einem Reagenzglas hören mit dem gleichen Nukleotid auf Kaspar Fleckenstein, Biologie S2, Frau Lautenschlager ddA ILC 3' 3' ddC 3' WHI WH √3' ddG H3¹ ddT 3' 16 5. AUSWERTUNG - DNA Fragmente werden der Größe nach durch Gel- Elektrophorese sortiert - Durch elektrische Spannung wandern sie zum Pluspol (nach unten) - kleinere gelangen schneller nach unten als größere - Durch Autoradiographie werden sie wegen des Primers sichtbar gemacht, - von unten nach oben wird nun in Richtung 5* nach 3* abgelesen, komplementärem zu analysierenden Strang kann man sich selbst erschließen Kaspar Fleckenstein, Biologie S2, Frau Lautenschlager WH WH Elektro- phorese ddA 3¹ ddC 3' WHE WHI THU A C GT 3' -Leserichtung- MAUTTUGACALOOT 3' ddG WH W3' ITUAAGCTGrowCam 5' с zu 3' 17 ddT 3' analysierende Sequenz Vergleich von DNA-Sequenzen Auffinden von Mutationen Erkennung von Erbkrankheiten Täternachweis in der Kriminalistik • Bestimmung von Abstammungen und Verwandtschaftsbeziehungen (Vaterschaftsnachweis) ● ● ● BEDEUTUNG/ANWENDUNG UND AKTUELLE RELEVANZ IN DER PANDEMIE • Bekämpfung von Antibiotika-Resistenzen ● ● Einsatz in der Corona-Pandemie zum Nachweis von SARS-CoV-2 Heute eher ,,Next Generation Sequencing (NGS)" Kaspar Fleckenstein, Biologie S2, Frau Lautenschlager King 1 01/00799 KD1 mögi. Vater 1. 18 Kaspar Fleckenstein, Biologie S2, Frau Lautenschlager SCHLUSS 19 ZWEITER TEIL DER BEANTWORTUNG DER LEITFRAGE: WELCHE BEDEUTUNG HATTE DIE SANGER-SEQUENZIERUNG FÜR MOLEKULARBIOLOGISCHE FORSCHUNG UND MEDIZIN? Die Einführung der DNA-Sequenzierung durch Frederick Sanger war ein Meilenstein in der molekularbiologischen Wissenschaft. Sanger gilt daher als "Vater der Gentechnik und des Genom- Projektes". Er wurde für seine bahnbrechenden Forschungen 1980 mit dem Nobelpreis für Chemie ausgezeichnet. Die Methode eröffnete neue Wege für Genetik, medizinische Diagnose & Therapie und Kriminalistik. Kaspar Fleckenstein, Biologie S2, Frau Lautenschlager X 20 HABEN SIE NOCH FRAGEN? Kaspar Fleckenstein, Biologie S2, Frau Lautenschlager 188 22 • https://www.ancestry.de/lp/dna-function • https://de.wikipedia.org/wiki/Desoxyribonukleinsäure ● ● ● QUELLEN https://www.simplyscience.ch/teens-liesnach-archiv/articles/was-ist-dna.html https://www.simplyscience.ch/teens-liesnach-archiv/articles/dna-kann-man- lesen.html https://viamedici.thieme.de/lernmodul/549699/subject/biochemie/molekularbiol ogie/nucleotide+und+nucleinsäuren/nucleotide+aufbau+und+funktionen https://flexikon.doccheck.com/de/Sanger-Sequenzierung https://www.youtube.com/watch?v=JcfnrJDTPGO Kaspar Fleckenstein, Biologie S2, Frau Lautenschlager 3 23 ● ● ● ● ● ● ● QUELLEN https://studyflix.de/biologie/dna-sequenzierung-2485 https://nebula.org/blog/de/dna-sequenzierung/ https://www.bio-sell.de/molekularbiologie/dntps.html https://www.youtube.com/watch?v=FsrCOksFz34&t=195s https://www.youtube.com/watch?v=JcfnrJDTPG0&t=29s http://www.biologie-schule.de/gelelektrophorese.php 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4S2ecFTr3elwUHm5fVY&ust=1614114648209000&source=images&cd=vfe& ved=0CAIQjRxqFwoTCIiO-eOz_u4CFQAAAAAdAAAAABAD https://www.google.com/url?sa=i&url=https%3A%2F%2Fstudyflix.de%2Fbiol 2486&psig=AOvVaw30LkovhXWQEb5Xq2yn9KM2&ust=161411472382800 0&source=images&cd=vfe&ved=0CAIQjRxqFwoTCPjD24i0_u4CFQAAAAA ogie%2Fsanger-sequenzierung- dAAAAABAD Kaspar Fleckenstein, Biologie S2, Frau Lautenschlager 26 ● QUELLEN (BILDER) https://www.google.com/url?sa=i&url=https%3A%2F%2Fwww.spektrum.de% frederick%2F58480&psig=AOvVaw0v5tbmL_bL04mcKhgUOrWW&ust=161 4114872450000&source=images&cd=vfe&ved=0CAIQjRxqFwoTCNCUpc- 2Flexikon%2Fbiologie%2Fsanger- 0_u4CFQAAAAADAAAAABAD • https://www.google.com/url?sa=i&url=https%3A%2F%2Fwww.khanacademy. org%2Fscience%2Fhigh-school-biology%2Fhs-molecular-genetics%2Fhs- sequencing&psig=AOvVaw2n6x8aKm8g2JUC4c_wTJAN&ust=16141149254 biotechnology%2Fa%2Fdna- 30000&source=images&cd=vfe&ved=0CAIQjRxqFwoTCPj4x- q0_u4CFQAAAAAAAAAABAJ Kaspar Fleckenstein, Biologie S2, Frau Lautenschlager 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t=12ahUKEwiFvtKJtv7uAhVWNuwKHUHzC8wQMygKegUIARDKAQ..i&docid=2- VWNuwKHUHzC8wQMygKegUIARDKAQ https://www.google.com/imgres?imgurl=https%3A%2F%2Fwww.ndr.de%2Fnachrichten%2Fhamburg contentxl.jpg&imgrefurl=https%3A%2F%2Fwww.ndr.de%2Fnachrichten%2Fhamburg%2FHamburge LOqtM&vet=12ahUKEwiThpGRtv7uAhXE_KQKHbMzAi4QMygAegUIARCHAQ..i&docid=xjkn6f UVxjTT8M&w=1067&h=600&q=coronavirus&client=safari&ved=2ahUKEwiThpGRtv7uAhXE_KQ %2Fcoronavirus3230_v- r-Forscher-Coronavirus-stammt-wohl-aus-Labor%2Ccorona6764.html&tbnid=SUCd8Ye3- KHbMzAi4QMygAegUIARCHAQ Kaspar Fleckenstein, Biologie S2, Frau Lautenschlager 30