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Die DNA-Sequenzierung nach Sanger

Die DNA-Sequenzierung nach Sanger

 DNA-Sequenzierung nach Sanger
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DNA-Sequenzierung nach Sanger Ausgangsstoffe dna-leitstrang d. nukleotide (dd.nukleotid 200 1 dna-polymerase Primer www And!! irrriialdamin! luxully bul! ddATP bood! Japony ixxxiinallard ddTTP Hoppong Aniballandal irritually ixxxila!! bulbullar! ddCTP bulu ixxxiluli iuriallar! iuriladdar ddGTP 1 DNA-Sequenz: 3' Ctacattaa9c 5 Komplementäre Sequenz: 5' 9a+9+aattcg 3' -> synthetisiert Vorgang der Sequenzierung 1. dna erhitzen damit die dna getrennt wird 2. dna auf 4 anätze verteilen 3. nukleotide der vier basen, primer, Polymerase+ didesoxynukleotid dazugeben 4. Primer&nukleotide lagern sich an einzelstränge an 5. dna-polymerase verbindet die nukleotide zu komplementären strängen 6. die stränge werden zu desoxynukleotiden (da, dt, dC, d9)+ didesoxynukleotide hinzugegeben 7. lagern sich an dna-strang an (dn) -> weil ihre konzentration höher ist -> komplementärer dna-strang verlängert sich 8. bei einem gewissen teil wird ein didesoxynukleotid angelagert -> kettenabbruch keine weiteren nukleotide können sich anlagern. => es kommt so zu unterschiedlich langen dna-strängen, die mit einem bestimmten nukleotid enden 9. gel-elektrophase kann sequenzierungsansätze trennen 10. bandenmuster entspricht dna-molekülen => um ein nukleotid unterschiedlich 11, dna-stränge enden mit dem selben nukleotid

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