Die DNA-Sequenzierung nach Sanger

•DNA-Sequenzierung nach Sanger Ausgangsstoffe dna-leitstrang d. nukleotide dd.nukleotid 200 : dna-polymerase Primer buil! Anda! ddATP bully buitelle ddTTP Arpong apping FPERFORMAN bullu irrelbrally Awwally ddCTP inwebbmalbard buurt!! ixxxitallarbeld! ddGTP DNA-Sequenz: 3' Ctacattaa9c 5 Komplementäre Sequenz: 5 90+9+aat+c9 3′ -> Synthetisiert Vorgang der Sequenzierung 1. dna erhitzen damit die dna getrennt wird 2. dna auf 4 anätze verteilen. 3. nukleotide der vier basen, primer, Polymerase+ didesoxynukleotid dazugeben 4. Primer&nukleotide lagern sich an einzelstränge an 5. dna-Polymerase verbindet die nukleotide zu komplementären strängen 6. die Stränge werden zu desoxynukleotiden (da, dt, dC, d9)+ didesoxynukleotide hinzugegeben 7. lagern sich an dna-strang an (dn) -> weil ihre konzentration höher ist. -> komplementärer dna-strang verlängert sich 8. bei einem gewissen teil wird ein didesoxynukleotid angelagert -> kettenabbruch keine weiteren nukleotide können sich anlagern => es kommt so zu unterschiedlich langen dna-strängen, die mit einem bestimmten nukleotid enden 9. gel-elektroPhase kann sequenzierungsansätze trennen 10. bandenmuster entspricht dna-molekülen > um ein nukleotid unterschiedlich 11, dna-stränge enden mit dem selben nukleotid

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