Praktikum - Protokoll Antibiotika Experiment - Quantitative Bestimmung der Antibiotika Wirkung

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4 Platten pro Person) - Es werden insgesamt 250 ml AB-Nährmedium hergestellt, da- von werden 200 ml mit 1,7% Agar (3,4g) für die Nährboden- platten benötigt. Das Nährmedium für das Grundschichtagar wird Autoklaviert. Die restlichen 50 ml AB-Nährmedium werden mit 1,3% Agar (0,65 g) für die 8 Weichagarröhrchen hergestellt. Das Nährmedium für die Weichagarröhrchen wird in 8 Re- agenzgläsern abgefüllt und anschließend Autoklaviert. Danach werden sie in ein 56°C H20-Bad warm und flüssig ge- - halten. Die Vorbereitung Es wird 50 ml autoklaviertes a.dem. ( demineralisiertes Was- ser benötigt. ) Man braucht 2 sterile Reagenzgläser Außerdem benötigt man sterile Filterpapiere indem man sie Autoklaviert. 4 Die Durchführung Die Durchführung wird pro Person durchgeführt. Die Hergestellten 4 Weichagarröhrchen welche Autoklaviert wur- den, werden mit jeweils 1 ml E.coli beimpft. Die mit E.coli beimpften 4 Weichagarröhrchen werden sofort auf die 4 Grundschichtagarplatten ausgegossen und mit der Drigalski- Spatel-Methode gleichmäßig auf der Platte ausgespatelt. Die beimpften Weichagarplatten werden abgekühlt und erstarrt. Die 2 Antibiotika-Proben in diesem Fall Tetracyclin und Ampicillin werden 1:10 und 1:100 in a.dem. verdünnt. Die Sterilisierten Filterpapiere werden jeweils einmal in die Aus- ganskonzentration vom Antibiotika, einmal in 1:10 und einmal in 1:100 verdünnten Antibiotika Proben getaucht und auf die beimpf- ten Platten gelegt. Dieser Vorgang wird für jedes Antibiotikum jeweils 2 mal durchge- führt, damit man am Ende insgesamt 4 Platten hat. Die beimpften Platten werden anschließend bei ca.30°C eine Woche lang bebrütet. 5 Nach einer Woche im Brutschrank bei ca 30°C konnte man die Wirkungsweisen von den 2 Antibiotika deutlich erkennen. Durchmesser der Hemmhöfe und Art des Bakterienrasens Ampicillin 2 Tetracyclin 1 1:10 Verdün- nung 1:100 Verdün- nung Rasen Ampicillin 1 26 mm 25 mm Ausgangskon- Durchmesser: 1,7 cm Durchmesser: 1,4 cm Durchmesser: 2,6 cm Durchmesser : 2,5 cm zentration 17 mm 14 mm Ergebnisse Ein großer und deutli- cher Hemmhof Sehr leichter Hemm- hof Kein Hemmhof Ein großer und deutli- cher Hemmhof Geschlossener Bak- terienrasen Durchmesser: 0,6 cm Durchmesser: 0,6 cm Durchmesser: 1,3 cm Durchmesser : 1,4 cm 6 mm 6 mm 13 mm 14 mm Sehr leichter Hemm- hof Sehr deutlicher und großer Hemmhof Kein Hemmhof Geschlossener Bak- terienrasen Deutlicher Hemmhof Durchmesser: 0,5 cm Durchmesser: 0,5 cm Durchmesser: 0,9 cm Durchmesser: 0,9 cm 5 mm 5 mm 9 mm 9 mm Tetracyclin 2 Kleiner aber deutli- cher Hemmhof Sehr deutlicher und großer Hemmhof Geschlossener Bak- terienrasen Deutlicher Hemmhof Kleiner aber deutli- cher Hemmhof Geschlossener Bak- terienrasen 6 Die Schlussfolgerung Anhand der Ergebnisse kann man deutlich erkennen, dass Tetra- cyclin eine stärkere Wirkung als Ampicillin hat. Die Hemmhöfe von Tetracyclin sind deutlich größer. Aus den Ergebnissen schlussfolgere ich, dass die Minimale Hemmstoffkonzentration von Ampicillin bei einer Verdünnung von 1:10 liegt und weil Tetracyclin eine stärkere Wirkung als Ampicillin hat liegt hier die Minimale Hemmstoffkonzentration bei bei einer größeren Verdünnung, in diesem Fall 1:100 vor. 7 Diskussion Ich habe beim Vergleich mit meiner Laborpartnerin und anderen Schülern herausgefunden, dass die meisten ähnliche Ergebnisse wie ich hatten. Aus den Ergebnissen vieler Schüler kann man er- kennen, dass Tetracyclin eine stärkere Wirkung und somit grö- ßere Hemmhöfe als Ampicillin hat. Literatur Für die Erstellung meines Veruchsprotokolls habe ich ausschließ- lich Materialien und Unterlagen vom Mikrobiologie Theorie und (Note =1) Praktikums Unterricht benutzt. 8