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DNA-Sequenzierung

DNA-Sequenzierung

 Definition:
Methode zur Bestimmung
der Nukleotid-Abfolge in
einem DNA-Molekül
DNA
radioaktiv
markierter-
Primer
Elektro-
phorese
- ddA
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Definition: Methode zur Bestimmung der Nukleotid-Abfolge in einem DNA-Molekül DNA radioaktiv markierter- Primer Elektro- phorese - ddA WHI 5'T CAT G G CACAGCTTGA 3' unnum 3 A G T A C C G T G T C G A A C I5 5'T CA 3' 3’ A G T A C C G T G T C G A A CT 5 H 3¹ ddC 3' Leserichtung- A CGT 93.1 DNA-Sequenzierung nach SANGER 3' A G T T G 5' ddG WH 3¹ 3' 5' T C A A Dna-Sequenzierung Kettenabbruch-Methode nach Frederick Sanger с A 3' zu ddT 3' -analysierende Sequenz 5' 3⁰ 50 +ddATP ATP ACTPR AGTPOTTP & +DNA-Polymerase +Primer(P) 3 3 Abbruch Nukleotid Adenin 5¹ Funktionsprinzip: 1.Doppelhelix wird durch Hitze in 2 Einzelstränge Man benötigt: • die zu bestimmende DNA als Ginzelstrang •DNA-Polymerase Abbruch Adenin •radioaktiv martierter Primer •4 Desoxynucleotid-Triphosphate •4 verschiedene Abbruchnucleotide gespalten 2. =>Primer lagert sich an Einzelstrang a genetik PATCADA an und bildet kurzes Stück Doppelstrang p*ddA => DNA-Polymerase verlängert den fehlenden der beiden komplementären DNA-Strange 3. I der 4 Basen wird zum Teil als ddNTP zugegeben 4. ddNTP besitzen keine 3' Hydroxil gruppe L>Kettenabbruch 5. Dadurch entstehen DNA-Fragmente unterschiedlicher Länge L>Primer oder ddNTPs sind radioaktiv martiert

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Cool, mit dem Lernzettel konnte ich mich richtig gut auf meine Klassenarbeit vorbereiten. Danke 👍👍

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