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Restriktionsenzyme
22.11.2021
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ما Bakterieller Schutz vor Phagen → Viele Bakterien haben Schutz vor Bakteriophagen. 1. 1. Phagen sind zellspezifisch (zellspezifische Oberflächen) 2. Jedes Baklenium verfügt über "primitives" Immunsystem Restriktionsendonukleasen • Enzyme der Restriktionsmodifikation (R-M) der bakteriellen Zelle ↳ Spaltel das Phosphat rückrat fremder DNA aufgrund eines nichtzellulären Spallet an palindromischen Sequenzen (Typ 11 Palindrom) ↳ spallet im inneren des Rückrats Endo nuklease! HIOS → Hydrolysteren unter 2mal Wassereinsatz beide DNA Strange der Helix ↳> 1st Phosphat - Zucker Rückrat gespalten können H-Brücken nichtmehr zueinander 5'- GAATTC-3' 3'-CTT AAG-5' 5'- CCC GGG -3' 3'- GGG CCC - s' s'- CGTACC-3' 3'-GCATGG-S' ECORL - ik Sma I KpnI prionsent → Je nach Restriktionsenzym enstehen stumple (blunt) oder klebrige (stidy) ends. ! Enden immer am 3' Ende mit der Hydroxy Gruppe und am 5' Ende mit der Phosphatgruppe ! S'-G 3'-CTTAA s.ccc 3'-666 3' s'stidy- ends 5'-GGTAC 3'-C AATTC-3' C-S¹ blunt ends p=0. GGG-31 CCC-5' C-3' CATGG-S 3'stiday-ends Methylierungsmuster #₂0 M o-D=0. بسهم → treten in Eu- und Archaebakterien auf →Drenen zur Phagenabwehr erkennen fremde Sequenz o. fehlende Methylierungsmuster ↳ Hydrolysiering → Viele RE existieren als Isaschizomere (Isoenzyme) → Erkennen gleiche Schnittstelle, sind aber nicht gleich ↳ Isaschizomere erkennen gleiche Schnittstelle und führen gleichen Schnitt durch ↳sind evolutiv verwandt, zeigen ähnliche Aotein strukturen → Neo-Isoschizomere erkennen dre (fast) gleiche Schnittstelle, können aber
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