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Gentransfer und Selektion
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Vermehrung rekombinanter DNA, Plasmid, Markergene, Restriktionsenzyme, Antibiotikaresistenzen, Stempel
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Markergen 1 →Gen für Z.B. Tetracyclinresistenz Ablauf gentransfer und Selektion Ziel Vermehrung rekombincanter DNA Vektor Plasmid Cinsatz derselben Restriktionsenzyme?' Temperatur- wechsel auf Bartenenzelle 2 Transformation Ori -Replikations urspring 37° C V Behandling and G multiple cloning site (M(S) ✓ innerhalb hat eine Schnittstelle pro Restrictionsenzum, um Plasmid aufzuschneiden Machergen 2 →7 Gen 2.B. für Stempel ✓ Übertragung der Bantenenholonie plierch Stempel) Nährboden mit Ampicillin O Frendgen C Ampicillinvesitenz Restriktions Funktion des Markergens wird deaktiviert. enzyme Baktenenhulter aus → gewrünschter Kolonie → Selection B.ECORL Sticky ends ) Lugabe Gen mit gleichen Schrittpunkten ← Zugabe Ligase Eerbou geglicht rekombinantes Plasmid intl. Fremdgen Selection durch Antibiotikaresistenzen V gewünschte Kolonie hompetent gemachtes Baktenum Fellmembran wird durchlässig Nährboden mit Tetracyclin gewünschte Colome ferth Kolonie mit Plasmid ohne Fremdgen besitz beide RB-Resistenzen OTVAR
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So ein schöner Lernzettel 😍😍 super nützlich und hilfreich!